Pharmaceutical Technology Ed. 173
48 EdiciónSudamérica 2021 - N º173 Pharmaceutical Techno logy Análisis de células v i v as en tiempo real de ensayos tumorales 3D con múltiples esferoides, coculti v ados U n creciente cuerpo de evidencia sugiere que los estudios que involu- cran microtissues y organoides brin- dan observaciones más predictivas y traslacionales en comparación con los modelos de células monocapa 2D (1,2). Además, está aumentando el uso de esferoides tumorales multicelulares para la investigación en oncología e inmuno-oncología. Los modelos in vitro que intentan recapitular el microambiente tumo- ral pueden incorporar una matriz extracelular (MEC) y tipos de células adicionales, como células estromales, endoteliales e inmunes, lo que permite a los investigadores evaluar la fun- cionalidad de los fármacos, evaluar la quimiorresistencia y las interacciones entre células tumorales inmunes. Los métodos actuales para evaluar PUBLINOTA el crecimiento y el encogimiento de esferoides tumorales a menudo están limitados por flujos de trabajo de análi- sis laboriosos, costosos y que consumen mucho tiempo. Estos pueden incluir sondas fluorescentes que perturban la biología, un análisis de punto final que puede perder información temporal reveladora o lecturas bioquímicas indi- rectas que pasan por alto una valiosa información morfológica. El sistema de análisis de células vivas Incucyte® es una plataforma de análisis y adquisición de imágenes de fluorescencia de dos colores y contraste de fase totalmente automatizada que reside dentro de una incubadora de cul- tivo celular estándar para una viabilidad celular óptima y el mantenimiento de la relevancia fisiológica. El instrumento está diseñado para escanear placas y matraces de cultivo de tejidos repeti- damente durante intervalos de tiempo predeterminados, lo que permite a los usuarios monitorear continuamente los cultivos y generar información cinética cuantificable. El módulo de software Incucyte® Spheroid actúa como un centro de control rápido, flexible y potente para el análisis continuo de células vivas, incluida la adquisición, el procesamiento y la visualización de da- tos de imágenes. Los reactivos incluyen etiquetado celular no perturbador, GFP (proteína verde fluorescente) dirigida al núcleo y RFP (proteína roja fluorescente) para la cuantificación celular. Principio de ensayo Esta nota de aplicación describe el uso del sistema de análisis de células vivas Incucyte® y los ensayos de es- Kalpana Patel 1 , Miniver Oliver 1 , Nevine Holtz 2 , Tim Jackson 2 , Nicholas Dana 2 , Tim Dale 1 , Del Trezise 1 1 . Sartorius, Hertfordshire, United Kingdom 2. Sartorius, Ann Arbor, United States Para más información comunicarse con bps-requests@sartorius.com
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