Pharmaceutical Technology Ed. 173

Pharmaceutical Techno logy 51 EdiciónSudamérica 2021 - N º173 La visualización de imágenes de campo claro res- palda los efectos citotóxicos específicos de Lapatinib en el tamaño de SK-BR-3 y un efecto citotóxico no específico de CMP en los esferoides MCF7 y SK-BR-3 (Figura 5). Las curvas de respuesta a la concentración se cons- truyeron utilizando un análisis de área bajo la curva (AUC) de los datos del curso del tiempo (Figura 6). Inhibición del crecimiento de múltiples esferoides causada por Lapatinib y ZK164015 alineada con el per- fil de expresión conocido de los receptores dirigidos por estos agentes (3). El inhibidor dual de la tirosina quinasa EGRF y HER2, Lapatinib, causó una inhibición dependiente de la concentración del crecimiento de múltiples esferoides SK-BR-3 y BT-474, mientras que el antagonista del receptor de estrógenos (ER) ZK164015 fue un potente inhibidor de MCF7 multi- esferoide crecimiento.El ZK164015 tuvo poco o ningún efecto sobre múltiples esferoides desprovistos de expresión de ER. El inhibidor de ADN topoisomerasa, CMP, provocó una inhibición comparable del creci- miento en todos los tipos de múltiples esferoides. ADCC inducida por Herceptin® en múltiples esferoides positivos para HER2 La regulación de la destrucción inmunomediada por anticuerpos monoclonales es un mecanismo de acción importante en los tratamientos de inmunoterapia (4). La unión de anticuerpos como Herceptin (un anti- cuerpo monoclonal humanizado dirigido al receptor HER2) a los receptores induce citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC). El impacto de la ADCC inducida por Herceptin se evaluó en multiesferoides HER2 positivos (SKOV3 y BT474) y HER2 negativos (MCF7). Se cultivaron conjuntamente multiesferoides tumorales, que expre- saban de forma estable RFP nuclear restringida (NR) Efectos temporales sobre la morfología revelados a través de imágenes Incucyte® DF Brightfield. Se sembraron células MDA-MB-231 en placas de 96 pocillos de fondo plano sobre un lecho de Matrigel en mono o co cultivo con NHDF (relación 1:1, 1000 células / pocillo para cada uno) y se dejó que se formaran múltiples esferoides (3 d ). Las imágenes de campo claro de Incucyte® S3 DF comparan condiciones de mono y cocultivo durante 7 días (10 días después de la siembra de células). Tenga en cuenta el impacto temporal de los NHDF en la morfología del esferoide. FIGURA 3 Las vistas de los vasos de Incucyte® S3 permiten una visualización y cuanti- ficación rápidas de los efectos del tratamiento. Se sembraron células MCF7 cocultivadas con NHDF en placas de 96 pocillos de fondo plano prerreves- tidas (Matrigel) (relación 1:1, 1.000 células / pocillo de cada una) y se dejó que se formaran múltiples esferoides (3 d). A continuación, se trataron los esferoides con diluciones en serie de compuestos citotóxicos y estándar de atención conocidos (5 días). Las vistas de los vasos de la microplaca Incucyte® muestran los efectos de los tratamientos en el tamaño de múltiples esferoides. La imagen superior muestra la máscara de segmentación del área de objeto de campo claro (μm2) (amarilla) 5 días después del tratamiento. La imagen inferior muestra el área total del objeto de campo claro (μm 2 ) (eje y) de pocillo individual a lo largo del tiempo (0 a 5 días después del tratamiento) (eje x). FIGURA 4