Pharmaceutical Technology Ed. 173

Pharmaceutical Techno logy 53 EdiciónSudamérica 2021 - N º173 segmentación y cuantificación cons- tantes de imágenes de campo claro permite la evaluación cinética de los perfiles de crecimiento dependientes de las células y el impacto de las células estromales en la resistencia de múltiples esferoides tumorales a los agentes qui- mioterapéuticos. Brightfield en combinación con imágenes de fluorescencia permite la visualización y cuantificación de la toxicidad mediada por células inmunes de los multiesferoides tumorales. La adquisición de imágenes auto- matizada de Incucyte®, combinada con herramientas de análisis fáciles de usar y protocolos probados en laboratorio, permite a los usuarios no expertos ge- nerar rápidamente datos reproducibles, FIGURA 6 Análisis farmacológico robusto y reproducible mediante la generación de curvas de concentra- ción-respuesta. Se sembró un panel de cuatro líneas de células tumorales de mama en placas de fondo plano de 96 pocillos con NHDF (relación 1:1, 1.000 células / pocillo para cada una en un lecho de Matrigel). Se dejó que se formaran múltiples esferoides durante 3 días antes del tratamiento con agentes citotóxicos y de tratamiento estándar. Las curvas de respuesta a la concentración (CRC) representan el área bajo la curva (AUC) de los datos del curso temporal del área total de campo claro (μm2) (no se muestra) de 0 a 6 d (MCF7, MDA-MB-231) o de 0 a 10 d (SK - BR-3, BT-474) postratamiento. Cada punto de datos representa la media ± SEM, n = 9-12 pozos. Nota: farmacología de compuestos diferencial entre tipos de células. realizar análisis y generar gráficos listos para publicación. En conjunto, el sistema de análisis de células vivas Incucyte®, el módulo de software Spheroid y los reactivos pro- porcionan una plataforma técnica única y eficiente que se puede incorporar a los flujos de trabajo existentes n Referencias 1. Lv D, et al. Three-dimensional Cell Culture: A Powerful Tool in Tumor Research and Drug Discovery (Re- view). Spandidos Publications. Oncology Letters, 14;6999–7010 (2017). 2. Verjans ET, et al. Three-dimensional cell culture models for anticancer drug screening: Worth the effort? Cell Physiol. Apr;233(4);2993–3003 (2018). 3. Subick K, et al. The Expression Patterns of ER, PR,HER2, CK5/6, EGFR, Ki-67 and AR by Immunohistochemical Analysis in Breast Cancer Cell Lines. Breast Cancer: Basic and Clinical Research, 4;35– 41 (2010). 4. Griggs J, et al. The State of the Art: Immune-mediated Mechanisms of Monoclonal Antibodies in Cancer The- rapy.BritishJournalofCancer,104;1807–1812(2009).